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適用范圍

維生素B12(鈷胺素)檢測(cè)試劑盒適用于奶粉中添加維生素B12（VB12）含量的定量分析。該試劑盒可進(jìn)行96次測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)原理

維生素B12(鈷胺素)檢測(cè)試劑盒采用微生物方法定量檢測(cè)奶粉中添加VB12的含量。微生物檢測(cè)體系與國(guó)際規(guī)范保持一致。德氏乳桿菌的生長(zhǎng)離不開(kāi)VB12，其生長(zhǎng)強(qiáng)度與樣品中VB12的含量有關(guān)，將已加入德氏乳桿菌的VB12檢測(cè)培養(yǎng)基、樣品或標(biāo)品加入到微孔中，37°C避光孵育，德氏乳桿菌開(kāi)始生長(zhǎng)直至VB12被完全消耗，44-48小時(shí)完成孵育。采用酶標(biāo)儀讀取610-630nm或540-550nm下樣品的渾濁度，將樣品濁度與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比即可得到樣品中VB12的含量。

更多產(chǎn)品如下：

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25℃）平?衡?30min?以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中?并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于?2～8℃。切勿?冷凍。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)?準(zhǔn)品做?2?孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。?

5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本?50μL?到對(duì)應(yīng)的微孔中，然?后加入?VB12抗試劑?50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋?板后置?25℃避光環(huán)境中反應(yīng)?30min。?

6、洗板：小心揭開(kāi)蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液?250μL/?孔，充分洗滌?4~5?次，每次間隔?10s，用吸水紙拍干（拍?干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。?

7、加酶標(biāo)物：加入?VB12酶標(biāo)物?100μL/孔，輕輕振蕩混勻，?用蓋板膜蓋板后置?25℃避光環(huán)境中反應(yīng)?15min，取出重復(fù)?洗板步驟?6。?

8、顯色：加入底物液?A?液?50μL/孔，再加底物液?B?液?50μL/?孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應(yīng)?15min。?

9、測(cè)定：加入終止液?50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀?于?450nm?處（建議用雙波長(zhǎng)?450/630nm?檢測(cè)，請(qǐng)?jiān)?5min?內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定每孔?OD?值。